熒光原位雜交分析系統(fluorescence in situ hybridiation,FISH)作為一種強大的分子生物學技術,在細胞遺傳學、腫瘤研究、基因定位等諸多領域發揮著關鍵的作用。它能夠直接在細胞或組織切片上對特定核酸序列進行定性、定量以及定位分析,為科研和臨床工作提供了準確且直觀的檢測結果。
熒光原位雜交分析系統的基本工作原理:
(一)探針設計與標記
FISH 技術的基礎在于特異性探針的運用。首先,依據目標核酸序列(如特定基因、染色體區域等)設計互補的核酸探針。這些探針通常由 DNA 或 RNA 構成,并且會通過特定的化學方法進行標記。常用的標記物是熒光染料,如異硫氰酸熒光素(FITC)、德州紅(Texas Red)等。標記后的探針在保持與目標序列特異性結合能力的同時,能夠在雜交后發出可被檢測到的熒光信號。